1. 什么是Bradford配方
Bradford配方，又称作布拉德福德独家配方，是一种广泛用于测定蛋白含量的方法。该方法基于比色法，利用染料与蛋白质的相互作用来测定样品中蛋白质的含量。由于该方法具有灵敏度高、操作简单、结果准确等特点，且被广泛认可和应用，因此成为一种全球热销的蛋白质测定解决方案。
2. Bradford配方的原理
Bradford配方的基本原理是在酸性条件下，考虑到蛋白质中存在苯丙氨酸和色氨酸，与丝氨酸、半胱氨酸等氨基酸相比，其与Coomassie蓝G结合的能力更强。因此，Coomassie蓝G与蛋白质分子中的氨基酸中较多的苯丙氨酸、色氨酸等芳香族化合物作用，形成Coomassie蓝G-蛋白质复合物，使溶液变为蓝紫色。溶液中Coomassie蓝G含量的增加，会导致其与蛋白质中较多的苯丙氨酸、色氨酸相互作用，这种共同作用使复合物形成，从而改变整个溶液的颜色，产生吸光度。
3. Bradford配方的优势
与其他蛋白质检测方法相比，Bradford配方具有以下优点：
灵敏度高：由于Bradford配方可以特异地结合蛋白质，因此它可以检测到较小的蛋白质含量。
稳定性好：Bradford配方的化学性质稳定，不容易受到样品的干扰，因此可以在较长时间的检测过程中保持准确性。
成本低：Bradford配方使用的试剂成本相对较低，不需要使用昂贵的设备，因此可以在一些实验室中广泛应用。
变异性低：Bradford配方的变异性较低，通过合理的实验设计和操作，可以得到较为稳定的结果。
4. 如何使用Bradford配方
使用Bradford配方可以测定样品中的蛋白质含量。下面是一些使用Bradford配方的一般步骤：
制备标准曲线：使用不同浓度的蛋白质制备一系列标准品，随后将这些标准品与Bradford试剂混合并通过分光光度计检测它们的吸光度。
制备待测样品：用所需样品的RA纯度计算出它的浓度（mg/mL），用去离子水稀释后达到Bradford试剂的测量范围。
加入Bradford试剂：将Bradford试剂加入待测样品中并混合均匀。
检测吸光度：孵育混合物5-10分钟，然后使用分光光度计检测样品的吸光度。
比较标准曲线：通过分析样品的吸光度并使用事先制备的标准曲线进行比较，计算出样品中蛋白质的浓度。
按照上述操作，可以使用Bradford配方准确、快速地测定样品中蛋白质含量。
