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bradford测蛋白,布拉德福检测蛋白质含量,提高科学研究效率

来源:本站 时间:2023-10-17 14:10:38 编辑:出国留学 手机版

Bradford测蛋白,布拉德福检测蛋白质含量,提高科学研究效率

1. 概述

布拉德福检测法是一种常用的测定蛋白质含量的方法。该法采用的是一种名为"Bradford试剂"的显色剂,可以与蛋白质分子内部的亲水基团发生相互作用,因此可以测定样品中蛋白质的含量。此方法简单易行、快速精确,因此在科学研究中得到了广泛应用。

 概述

2. 原理

Bradford试剂中含有一种吸光度在465nm处最大的染料,称为"Coomassie Brilliant Blue G-250"。该染料与蛋白质中的亲水基团发生相互作用,会导致Bradford试剂的吸光度发生变化。该变化能够被光度计测定,从而计算出样品中蛋白质的含量。

3. 操作步骤

将待测样品加入Bradford试剂中,混匀均匀。

等待10分钟,让试剂完全与蛋白质反应。

使用光度计在465nm处测定吸光度。

利用标准蛋白质制备的标准曲线,通过吸光度值计算出样品中蛋白质的含量。

需要注意的是,由于Bradford试剂与蛋白质中的特定官能团发生相互作用,因此不同种类的蛋白质对Bradford试剂的响应程度有所不同。因此,需要在制备标准曲线时选用与待测样品蛋白质相同种类的标准蛋白质。

4. 应用

由于Bradford测定法快速、简便、准确,因此在生物化学、分子生物学、免疫学等方面得到广泛应用。比如,研究蛋白质的结构和功能时,需要将不同的蛋白质进行分离纯化。在这个过程中,需要测定蛋白质含量以确定纯化效果。

另外,在进行生物反应时,需要知道反应液的蛋白质浓度以求得最佳反应条件。此时也可以采用Bradford测定法进行蛋白质含量的测定。

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